Kidney Int ：肾小管生物钟调节内分泌导致糖尿病患者肾糖异生增强和加重高血糖

故事情节及目的：在肝炎高血压之中，脾脏通过增加原大便之中的重吸收和上调近端毛细血管之中的糖异生来促进肝炎过敏反应的引发。然而，血糖水平的慢性上升可能反过来加剧肝炎脾病(DN)，这是肝炎最致使的并发症之一，其特征是脾小球、脾毛细血管和脾脏血管受损。虽然葡萄糖诱发是肝炎脾病引发和发展的主要因素，但在大多数肝炎高血压之中，过敏反应本身并不会加剧脾功能不全。这表明，合并症或周边环境、遗传或表观遗传的变化可能是启逆和/或加速成果DN所必需的。心率是一种普遍存在的分子计时程序，它将细胞内、组织和系统的生物体功能与24全程的周边环境一段时间段互联。全局心率驱逆细胞内类型和组织特有的节律，它们的失调与一系列疾病的发病和/或成果有关。然而，肝炎高血压脾脏之中内在心率的病理生理发挥作用仍不清楚。

方法：为了彻底解决这个问题，我们用链脲佐菌素诱发了足细胞内(cKOp豚鼠)或脾毛细血管(cKOt豚鼠)之中忽视昼夜节律特异性调节变异BMAL1的豚鼠患I型肝炎。

豚鼠模型制备：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1豚鼠(cKOp豚鼠)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1豚鼠(cKOt豚鼠)经DOX(饮水之中2 mg/ml)执行2紧接著，Bmal1(ARNTL)性状失活。他们的IgG(Bmal1lox/lox豚鼠)接受相同的DOX治疗。在DOX治疗结束一紧接著，通过静脉静脉注射链脲佐菌素(STZ，50 mg/kg体重，每日5天)诱发I型肝炎。溶媒执行的豚鼠接受PBS的溶媒静脉注射。所有检验以外在之后一次静脉注射STZ或溶媒8紧接著互联进行。在所有检验之中，从ZT9绞死的豚鼠头上通过观察组织和肝脏(ZT-Zeitgeber一段时间单位；ZT0是开灯一段时间，ZT12是关灯一段时间)。

葡萄糖笼内：豚鼠被饲养在个体葡萄糖笼内子之中(Tecniplast，法国)。在4天的适应期后互联进行24全程的大便液收集。

血红蛋白和大便液克隆测量：用Vaudois之中心医院外科检验室(LCC)测量大便和血红蛋白Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷酯盐、肌酐、、大便酯和大便素ppm及渗透压。用酯碱祯(Metrohm)测量大便液pH差值。使用EPOC肝脏统计分析祯(西门子公司医疗)量度逆-静脉混合血的肝脏pH差值和血气。大便铵测量选用Berthelot法。大便可滴定酯测量选用Chan25方法。选用放射免疫法(DPC)测量血红蛋白醛固酮水平。用Mercodia公司的试剂盒测量血红蛋白胰岛素。

耐量试验(GTT)：禁食15全程后，给空白IgG和cKOt豚鼠静脉静脉注射(1g/kg体重)。分别于静脉注射在此之前(t=0)、静脉注射后15、30、60、90、120、180min，用血糖校准祯测量血糖。

胰岛素耐量试验(ITT)：禁食4h后，给IgG和cKOt豚鼠静脉静脉注射0.5U/kg体重的重组人胰岛素(人重组胰岛素，Sigma)。分别于胰岛素静脉注射在此之前(t=0)、胰岛素静脉注射后15、30、45、60、90、120、150、180min测量血糖。如果血糖调低2 mm以下，则通过静脉静脉注射30毫克解救豚鼠，并将其排除在统计分析之外。

RNA核酯技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus之中的描述互联进行。使用GRCm38.92性状注释。使用TMM归一化对性状计数互联进行定标，并使用LIMMA R包27之中的“CPM”函数将其对数反转为每百万计数(CPM)。计算了KO和Ctrl逆物在未执行(PBS)和执行(STZ)条件下的区别表达出来以及两者之间的交互发挥作用。对于这三种来得之中的每一种，选择FDR

结果：在患有肝炎的cKOp和cKOt豚鼠之中，心率功能障碍与肝炎脾病的引发从未相关性。然而，与链脲佐菌素治疗的IgG相比，患有肝炎的cKOt豚鼠表现出加过敏反应加重，大便之中排泄增加，多大便增加，脾脏肥大越来越相比。mRNA和酵素表达出来统计分析推断，与肝炎IgG豚鼠相比，cKOt肝炎豚鼠脾脏之中的糖异生种系统显著提升。CKOt肝炎豚鼠的特异性统计分析和功能统计分析确定了直接或间接影响糖异生种系统的多种程序的变化。

结论：我们证明了内在脾毛细血管心率功能障碍可通过提升脾近端毛细血管的糖异生而加重肝炎过敏反应，促使务实了心率调节在肝炎高血压之中的重要性。

原文出处：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24